等度液相色譜分析儀是一種高效液相色譜儀(HPLC)的類型,它利用混合物在液-固或不互溶的兩種液體之間分配比的差異,對(duì)樣品中的化合物進(jìn)行分離和分析。在等度液相色譜中,流動(dòng)相的組成和比例在分析過(guò)程中保持恒定,因此得名“等度”。
等度液相色譜分析儀的工作原理基于樣品分子在固定相和流動(dòng)相之間的分配和吸附作用。樣品溶液被注入色譜柱后,樣品中的各組分與固定相發(fā)生相互作用。由于各組分在固定相和流動(dòng)相之間的分配系數(shù)不同,它們?cè)谏V柱中的移動(dòng)速度也會(huì)不同,從而實(shí)現(xiàn)組分的分離。分離后的組分依次進(jìn)入檢測(cè)器,檢測(cè)器將樣品組分的信號(hào)轉(zhuǎn)換為電信號(hào),經(jīng)過(guò)數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)記錄和分析,最終生成分析報(bào)告。
等度液相色譜分析儀的標(biāo)準(zhǔn)操作步驟:
一、操作前準(zhǔn)備
檢查儀器電源、線路、廢液瓶是否完好,廢液及時(shí)清空
配制等度單1流動(dòng)相,經(jīng)濾膜過(guò)濾、超聲脫氣15-20分鐘
檢查色譜柱連接無(wú)誤,確認(rèn)柱流向正確,擰緊接頭
準(zhǔn)備待測(cè)樣品,樣品過(guò)濾除雜,備好標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照品
二、開(kāi)機(jī)預(yù)熱
依次打開(kāi)主機(jī)電源、高壓泵、檢測(cè)器、電腦工作站
開(kāi)啟檢測(cè)器光源,預(yù)熱30分鐘,穩(wěn)定基線
設(shè)置儀器環(huán)境溫度,穩(wěn)定實(shí)驗(yàn)室環(huán)境
三、流動(dòng)相平衡
將吸液頭放入流動(dòng)相瓶?jī)?nèi),排盡管路氣泡
設(shè)置合適流速、柱溫、檢測(cè)波長(zhǎng)
開(kāi)啟高壓泵,以設(shè)定流速?zèng)_洗平衡色譜柱
持續(xù)走基線,直至基線平穩(wěn)無(wú)漂移
四、標(biāo)準(zhǔn)品測(cè)定
用進(jìn)樣針吸取標(biāo)準(zhǔn)溶液,潤(rùn)洗進(jìn)樣閥3-5次
準(zhǔn)確進(jìn)樣,啟動(dòng)工作站開(kāi)始采集數(shù)據(jù)
記錄標(biāo)準(zhǔn)品出峰時(shí)間、峰面積,建立標(biāo)準(zhǔn)參照
五、樣品檢測(cè)
潤(rùn)洗進(jìn)樣閥后注入待測(cè)樣品
點(diǎn)擊開(kāi)始運(yùn)行,自動(dòng)完成樣品分離檢測(cè)
同一批次樣品連續(xù)測(cè)定,做好編號(hào)記錄
觀察出峰狀態(tài),異常及時(shí)停機(jī)調(diào)整
六、數(shù)據(jù)處理
檢測(cè)完成保存圖譜與實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)
對(duì)照標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品含量、濃度
核對(duì)數(shù)據(jù)無(wú)誤,導(dǎo)出打印檢測(cè)報(bào)告
七、關(guān)機(jī)清洗流程
樣品全部測(cè)完后,先用純水沖洗含鹽流動(dòng)相管路
更換甲醇/乙腈有機(jī)相,低流速?zèng)_洗色譜柱及整個(gè)流路
沖洗干凈后,依次關(guān)閉高壓泵、檢測(cè)器光源
關(guān)閉儀器主機(jī)、電腦電源
整理進(jìn)樣針、器皿,清理操作臺(tái),做好使用記錄